beta Actin CRISPR Plasmide (m)

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Datenblatt

- Zielspezies: mouse; für das entsprechende human Produkt, verwenden Sie bitte beta Actin CRISPR Plasmids (h)
- CRISPR/Cas9 KO Plasmide bestehen ausbeta Actin-spezifischen 20 nt guide RNA Sequenzen, die aus der GeCKO (v2) Datenbank stammen
- gRNA Sequenzen leiten die Cas9 Endonuklease spezifisch, um einen gezielten Doppelstrangbruch (DSB) in der genomischen DNA herbeizuführen
- Gen-spezifische CRISPR Plasmide sowohl für den Knockout als auch für die Aktivierung von Genen sind verfügbar. Detaillierte Produktinformation finden Sie im hier below
- Zur Überprüfung der Herunterregulation oder einer Aktivierung des Gens empfehlen wir die Verwendung des beta Actin Antikörpers (C4): sc-47778
- Alle Produkte werden als transfektions-fertige, aufgereinigte Plasmid DNA angeboten mit Ausnahme der Lentiviralen Aktivierungs Partikel, welche speziell für die Verwendung auf schwer zu transfizierenden Zellen als Lentivirale Partikel verpackt worden sind.

Lentivirale Aktivierungs-Partikel
Publikationen
Empfohlene Supportprodukte für CRISPR und HDR
Empfohlene Produkte für Kontrollexperimente

Siehe auch...

Actin Antikörper zur Analyse von Zellreaktionen auf Actin CRISPR Produkte
Actin Inhibitors für die funktionelle Analyse zellulärer Antworten auf Actin
Erfahren Sie mehr über das CRISPR System
CRISPR/Cas9 KO Plasmide, Double Nickase Plasmide und CRISPR/dCas9 Aktivierungs-Plasmide sind "Lizenzprodukte" deren Verwendung einer beschränkten Lizenz unterliegt klicken Sie hier.

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Gen ID

Spezies	Gen	Gen ID	Chromosomaler Locus	mRNA (Isoform) Accession Nummer	Protein Accession Nummer	OMIM™ Nummer
Mouse	Actb	Entrez Gene ID: 11461	5 G2	NM_007393	UniProt ID: P60710	N/A

Beschreibung

20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
beta Actin CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid (m) besteht aus einem Gemisch aus drei Plasmiden, die jeweils für die Cas9 Nuklease und eine beta Actin-spezifische 20 nt guide RNA (gRNA) kodieren, um maximale Knockout Effizienz zu gewährleisten.
gRNA Sequenzen wurden aus der GeCKO (v2) Bibliothek abgeleitet. Sie leiten das Cas9 Protein zum entsprechenden Zielgen, wo das Enzym einen spezifischen Doppelstrangbruch (DSB) der genomischen DNA verursacht.
**** ACHTUNG: Für dieses Knockout Plasmid ist KEIN entsprechendes HDR erhältlich. **** Bitte verwenden Sie sc-418965-KO-2 und sc-418965-HDR-2 falls eine Selektion der Zellen mittels Puromycinresistenz gewünscht wird.
Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: beta Actin: sc-47778

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Beschreibung

20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
beta Actin HDR Plasmid (m2) ist für die Co-Transfektion mit dem beta Actin CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) empfohlen
beta Actin HDR Plasmid (m2) wird als Gemisch bestehend aus zwei bis drei Vektor-Plasmiden geliefert. Die einzelnen Vektor-Plasmide kodieren jeweils für eine zielspezifische Matrize zur homologen Rekombination (HDR) an den entsprechenden Schnittstellen, die erzeugt wurden vom beta Actin CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2)
Jede HDR Matrize kodiert für zwei 800 bp Homologiearme, welche spezifisch links und rechts an die umliegende genomische DNA des entsprechenden von Cas9-induzierten DNA-Doppelstrangbruchs (DSB) binden.
Das HDR Plasmid enthält ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen und ein RFP (rotes Fluoreszenz-Protein) zur visuellen Bestätigung der Transfektion. Puromycin dihydrochlorid (CAS 58-58-2) sc-108071 ist erhältlich als Gebinde zu je 25 mg, 50mg, 250mg oder 1g.
Die Gene für Puromycinresistenz und RFP werden von zwei LoxP sites flankiert, die ein weiteres Prozessieren durch den Cre Vector sc-418923 ermöglichen

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Beschreibung

20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
Das beta Actin Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
Die beiden gRNA-Sequenzen der beta Actin Double Nickase Plasmid (m2) unterscheiden sich von den beiden gRNA-Sequenzen der beta Actin Double Nickase Plasmid (m)
Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: beta Actin: sc-47778

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20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
beta Actin CRISPR Activation Plasmid (m) ist ein Transkriptionsaktivierungs System (SAM) welches für die gezielte Verstärkung der Genexpression bestimmt ist
beta Actin CRISPR Aktivierungsplasmide (m) bestehen aus 3 Plasmiden im Massenverhältnis 1:1:1: ein Plasmid kodiert für die deaktivierte Cas9 (dCas9) Nuklease (D10A und N863A) fusioniert an die Transaktivierungsdomaine VP64 sowie ein Gen für die Blasticidin Resistenz; ein zweites Plasmid kodierend für das MS2-p65-HSF1 Fusionsprotein sowie ein Gen für die Hygromycin Resistenz; ein drittes Plasmid kodierd für die Ziel-spezifische 20 nt guide RNA fusioniert an zwei MS2 RNA Aptamere sowie ein Gen für die Puromycin Resistenz.
Der entstehende SAM-Komplex (Mediator-Komplex zur synergistischen Gen-Aktivierung) bindet eine sequenzspezifische Region 200-250 nt upstream (in 5'-Richtung) des Transkriptionsstartsignals und rekrutiert dort ständig Transkriptionsfaktoren für eine verstärkte Gen-Aktivierung und Gen-Expression.
Nach der Transfektion kann die Effizienz der Genaktivierung per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: beta Actin Antibody (C4): sc-47778

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200 µl transduktionsfertige, hoch-titer CRISPR/dCas9 Lentivirale Aktivierungs-Partikel
beta Actin Lentiviral Activation Particles (m) sind ein SAM-Komplex (Mediator-Komplex zur synergistischen Gen-Aktivierung) gesteuertes System zur Transkriptionsaktivierung eines gewünschten Zielgens, um wirkungsvoll die spezifische Genexpression mittels lentiviraler Transduktion der Zellen zu erhöhen
beta Actin Lentiviral Activation Particles (m) enthalten die folgenden SAM Aktivierungselemente: deaktivierte Cas9 (dCas9) Nuklease (D10A und N863A) fusioniert an die Transaktivierungs-Domäne VP64, ein MS2-p65-HSF1 Fusionsprotein und eine zielspezifische 20nt gRNA. Des Weiteren enthalten sind die Resistenzgene für blasticidin, hygromycin und puromycin
Der entstehende SAM-Komplex (Mediator-Komplex zur synergistischen Gen-Aktivierung) bindet eine sequenzspezifische Region 200-250 nt upstream (in 5'-Richtung) des Transkriptionsstartsignals und rekrutiert dort ständig Transkriptionsfaktoren für eine verstärkte Gen-Aktivierung und Gen-Expression.
Die guide RNA der beta Actin Lentiviral Activation Particles (m2) kodiert für eine zielspezifische 20 nt guide RNA, die sich von der guide RNA der beta Actin Lentiviral Activation Particles (m) unterscheidet
Nach der Transfektion kann die Effizienz der Genaktivierung per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: beta Actin Antibody (C4): sc-47778

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