beta 2 Adrenergic Receptor/ADRB2/β2-AR Double Nickase Plasmid (h): sc-400291-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das beta 2 Adrenergic Receptor/ADRB2/β2-AR Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- beta 2 Adrenergic Receptor/ADRB2/β2-AR Double-Nickase-Plasmid (h) und beta 2 Adrenergic Receptor/ADRB2/β2-AR Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf ADRB2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: beta 2 Adrenergic Receptor/ADRB2/β2-AR: sc-271322
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
beta 2 Adrenergic Receptor/ADRB2/β2-AR Double Nickase Plasmid (h) | sc-400291-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
beta 2 Adrenergic Receptor/ADRB2/β2-AR Double Nickase Plasmid (h2) | sc-400291-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ADRB2 kodiert den humanen β2‑adrenergen Rezeptor (β2‑AR), einen G‑Protein‑gekoppelten Rezeptor, der Katecholamine erkennt und vorwiegend an Gs koppelt, um cAMP zu erhöhen und PKA‑abhängige Signalwege zu aktivieren. Über die Regulation der Adenylatcyclase‑Aktivität, die Rezeptordesensibilisierung durch GRKs und β‑Arrestine sowie nachgeschaltete transkriptionelle Programme beeinflusst ADRB2 den Tonus glatter Muskulatur, den Stoffwechsel in Herz‑ und Skelettmuskel sowie die Signalübertragung in Immunzellen. Der β2‑AR ist außerdem an Rezeptorinternalisierung und ‑Trafficking beteiligt, die Signaldauer und Signalbias prägen, und integriert kontextabhängig MAPK‑ und calciumgekoppelte Signalwege. Eine fehlregulierte ADRB2‑Signalgebung oder ‑Expression wurde u. a. bei Asthma und bronchialer Hyperreagibilität, in der kardiovaskulären Physiologie, bei metabolischen Phänotypen sowie in der stressassoziierten neuroimmunen Modulation untersucht, wodurch ADRB2 ein häufig genutzter Knotenpunkt für Signalweg‑ und Pharmakologieforschung ist.
beta 2 Adrenergic Receptor/ADRB2/β2-AR Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des ADRB2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von ADRB2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die ADRB2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit ADRB2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.