beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β₁-AR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400660

Visão geral

ADRB1 codifica o receptor adrenérgico beta 1 humano (β1-AR), um receptor acoplado à proteína G que se acopla principalmente à Gs para estimular a adenilil ciclase, elevar os níveis de cAMP e ativar programas de fosforilação dependentes de PKA. A sinalização do β1-AR regula a cronotropia e a inotropia cardíacas, influencia o manuseio de cálcio e a maquinaria contrátil, e integra-se às vias MAPK/ERK e GRK–β-arrestina, que moldam a dessensibilização do receptor e respostas transcricionais a jusante. Além dos cardiomiócitos, a atividade de ADRB1 modula a sinalização metabólica e de resposta ao estresse em múltiplos tecidos por meio da ação de catecolaminas simpáticas. Variações genéticas e funcionais em ADRB1 e a desregulação da sinalização do β1-AR têm sido associadas a fenótipos cardiovasculares e a respostas alteradas em modelos de remodelamento cardíaco e de estimulação adrenérgica excessiva.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ADRB1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ADRB1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ADRB1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ADRB1 para a investigação da sinalização de beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ADRB1 críticos para a função beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ADRB1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ADRB1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ADRB1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ADRB1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.