Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (h) Bek/FGFR2: sc-400249-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Bek/FGFR2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Bek/FGFR2 Double Nickase (h) et le plasmide Bek/FGFR2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FGFR2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Bek/FGFR2 Antibody (C-8): sc-6930
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Bek/FGFR2 | sc-400249-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Bek/FGFR2 | sc-400249-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FGFR2 (Bek) code une tyrosine kinase réceptrice de plusieurs facteurs de croissance des fibroblastes, qui régule le développement embryonnaire et l’homéostasie des tissus adultes en coordonnant la prolifération, la survie, la migration et la différenciation cellulaires. La liaison du ligand induit la dimérisation du récepteur et son autophosphorylation, activant les voies de signalisation canoniques MAPK/ERK, PI3K–AKT, PLCγ–PKC et STAT, et modulant les interactions (cross-talk) avec les signaux issus des intégrines et de la matrice extracellulaire. La signalisation de FGFR2 est étroitement contrôlée par l’épissage alternatif et des régulateurs de rétrocontrôle, ce qui en fait un nœud clé de la communication épithélio-mésenchymateuse et de l’organisation morphogénétique. Une activité FGFR2 dérégulée ou une utilisation altérée des isoformes est impliquée dans des troubles du développement cranio-facial et est fréquemment associée à des phénotypes de signalisation oncogénique dans plusieurs contextes tumoraux.
Bek/FGFR2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FGFR2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FGFR2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FGFR2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FGFR2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.