Bcr Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-431007

Descripción general

Bcr (región de agrupamiento de puntos de ruptura, *breakpoint cluster region*) de ratón codifica una proteína de señalización multidominio con actividad de quinasa de serina/treonina y un dominio activador de GTPasas (RhoGAP) de la familia Rho en el extremo C-terminal, lo que contribuye a la regulación de la dinámica del citoesqueleto, la adhesión y la migración celular. BCR participa en la transducción de señales dependiente de fosforilación y puede modular vías de pequeñas GTPasas que influyen en la proliferación y en las respuestas al estrés. En contextos hematopoyéticos, BCR es más conocido como socio de fusión con ABL1 en la señalización leucemogénica impulsada por BCR–ABL, por lo que sus funciones normales son relevantes para desentrañar la reorganización de vías oncogénicas. En modelos murinos, la perturbación de Bcr facilita estudios mecanísticos sobre la comunicación cruzada entre quinasas y GTPasas, la remodelación de actina y el control del crecimiento específico del contexto.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Bcr (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Bcr en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Bcr junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Bcr tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Bcr.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Bcr para la investigación de la señalización de Bcr, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Bcr críticos para la función de Bcr
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Bcr para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Bcr CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Bcr CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Bcr. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Bcr (m) y el plásmido HDR Bcr (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Bcr para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Bcr definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.