Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) BCMA: sc-403058-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) BCMA correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide BCMA Double Nickase (h) et le plasmide BCMA Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TNFRSF17. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: BCMA Antibody (D-6): sc-390147
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) BCMA | sc-403058-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) BCMA | sc-403058-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TNFRSF17 code l’antigène de maturation des cellules B (BCMA), un membre de la superfamille des récepteurs du TNF exprimé principalement par les cellules B à un stade tardif et les plasmocytes. BCMA se lie à APRIL et à BAFF pour activer NF-κB et des programmes de survie associés, qui soutiennent le maintien des cellules sécrétrices d’anticorps, la production d’immunoglobulines et la longévité des plasmocytes au sein de la niche médullaire. Une dérégulation de la signalisation et de l’expression de BCMA est étroitement liée à une expansion aberrante des plasmocytes et à des pathologies de la lignée B, ce qui en fait un nœud clé pour l’étude de l’immunité humorale, de la différenciation des cellules B et des voies de survie dépendantes du microenvironnement. En tant que récepteur de surface doté de ligands et d’effecteurs en aval bien caractérisés, BCMA constitue une cible exploitable pour analyser la signalisation médiée par les récepteurs et les réponses transcriptionnelles dans les cellules immunitaires humaines.
BCMA Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TNFRSF17 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TNFRSF17. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TNFRSF17. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TNFRSF17.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.