BATF2 Double Nickase Plasmid (h): sc-403270-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das BATF2 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- BATF2 Double-Nickase-Plasmid (h) und BATF2 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf BATF2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: BATF2: sc-293274
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
BATF2 Double Nickase Plasmid (h) | sc-403270-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BATF2 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-403270-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BATF2 (basic leucine zipper ATF-like transcription factor 2) ist ein interferoninduzierbares Mitglied des AP-1-Transkriptionsfaktor-Netzwerks, das Programme der Expression inflammatorischer Gene sowie Signale der angeborenen Immunantwort moduliert. In menschlichen Zellen ist BATF2 an der transkriptionellen Regulation downstream von Zytokin- und Pathogen-Erkennungswegen beteiligt und beeinflusst Aktivierungszustände von Makrophagen, die Antigenpräsentation sowie stressresponsive Transkriptionsausgaben. Seine Aktivität wird mit der Kontrolle von Zellproliferation und -differenzierung über kontextabhängige Interaktionen mit anderen bZIP-Faktoren in Verbindung gebracht und prägt damit die Kommunikation zwischen Immunsystem und Tumormikroumgebung. Eine dysregulierte BATF2-Expression wurde in mehreren Krankheitskontexten berichtet, darunter Krebs und chronisch-entzündliche Erkrankungen, wo BATF2 zur Untersuchung interferongetriebener Transkriptionszustände und Mechanismen der Immunregulation herangezogen wird.
BATF2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des BATF2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von BATF2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die BATF2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit BATF2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.