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Plasmide Double Nickase (h) Barx2 | sc-403458-NIC | 20 µg | $410.00 |
BARX2 code le facteur de transcription à homéoboîte Barx2, un régulateur nucléaire des programmes d’expression génique qui coordonnent les décisions de destinée cellulaire, la différenciation et la morphogenèse tissulaire. Barx2 s’intègre à des réseaux transcriptionnels du développement et de spécification des lignages et influence des processus tels que les transitions épithélio-mésenchymateuses, le remodelage du cytosquelette et l’organisation de la matrice extracellulaire. En biologie humaine, une expression altérée de BARX2 a été associée à des états de différenciation dérégulés ainsi qu’à des modifications des phénotypes cellulaires migratoires ou invasifs rapportés dans plusieurs contextes pathologiques. Ces caractéristiques font de BARX2 un nœud utile pour disséquer le contrôle transcriptionnel des voies de développement et des circuits de régulation génique dépendants du contexte.
Barx2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus BARX2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de BARX2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de BARX2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de BARX2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.