Plasmide CRISPR/Cas9 KO Barx1 (m): sc-419290
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Barx1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Barx1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Barx1 Antibody (392.8): sc-81956
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Barx1 (m) | sc-419290 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Barx1 (BARX homeobox 1) est un facteur de transcription à homéoboîte qui contribue à réguler la mise en place des structures embryonnaires et l’organogenèse chez la souris, avec des rôles majeurs dans le développement cranio-facial et des tissus dérivés de l’intestin antérieur. En se liant à l’ADN via son homéodomaine, Barx1 influence des programmes transcriptionnels qui coordonnent les interactions épithélio-mésenchymateuses, la spécification du destin cellulaire et le remodelage de la matrice extracellulaire au cours de la morphogenèse. L’activité de Barx1 s’inscrit à l’interface de réseaux de signalisation du développement tels que les voies Wnt/β-caténine et BMP, où elle peut orienter les issues de différenciation et la formation des frontières tissulaires. La dérégulation des réseaux géniques associés à Barx1 est pertinente pour l’étude des malformations congénitales et des troubles du développement touchant les structures faciales et gastro-intestinales.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Barx1 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Barx1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Barx1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Barx1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Barx1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Barx1 pour l'étude de la signalisation de Barx1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Barx1 essentiels à la fonction de Barx1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Barx1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Barx1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Barx1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Barx1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Barx1 plasmide HDR (m) et le Barx1 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Barx1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Barx1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.