BAI-2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406051

Übersicht

ADGRB2 kodiert den Adhäsions‑G‑Protein‑gekoppelten Rezeptor BAI‑2 (brain-specific angiogenesis inhibitor 2), einen Multidomänen‑Membranrezeptor, der im Nervensystem angereichert ist und an Zell‑Zell‑ sowie Zell‑Matrix‑Interaktionen beteiligt ist. Als Adhäsions‑GPCR integriert BAI‑2 extrazelluläre Signale mit intrazellulären Signalprogrammen, die die Organisation des Zytoskeletts, die Membrandynamik und die zelluläre Kommunikation prägen, und trägt damit zu Prozessen wie neuronaler Entwicklung und Gewebehomöostase bei. Eine Fehlregulation der Adhäsions‑GPCR‑Signalgebung wurde mit veränderten angiogenen und inflammatorischen Mikromilieus sowie mit Änderungen der zellulären Motilität und Differenzierungszustände in Verbindung gebracht. Entsprechend wird ADGRB2/BAI‑2 in Kontexten wie der Neurobiologie und tumorassoziierten Signalnetzwerken untersucht, in denen adhäsionsabhängige Signalwege krankheitsrelevante Phänotypen beeinflussen.

Das BAI-2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des ADGRB2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des ADGRB2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von ADGRB2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die BAI-2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von ADGRB2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der BAI-2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf ADGRB2-Exone abzielen, die für die BAI-2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere ADGRB2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom BAI-2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom BAI-2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des ADGRB2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das BAI-2 HDR-Plasmid (h) und BAI-2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von ADGRB2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten ADGRB2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.