Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
BAALC Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405852
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- BAALC El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico BAALC, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: BAALC Anticuerpo (H-12): sc-515606
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
BAALC Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405852 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
BAALC (brain and acute leukemia, cytoplasmic) codifica una proteína citoplasmática enriquecida en contextos hematopoyéticos y del neurodesarrollo, e implicada en la regulación del estado de las células progenitoras, incluidos aspectos de la proliferación y la diferenciación. En los linajes mieloides, la expresión de BAALC se utiliza con frecuencia como un correlato molecular de programas transcripcionales inmaduros y de salidas de señalización alteradas, intersectando con vías que moldean la progresión del ciclo celular, la supervivencia y el compromiso de linaje. Los niveles desregulados de BAALC se han asociado con leucemias agudas, donde se estudia como parte de redes más amplias de expresión génica vinculadas a la leucemogénesis y a la heterogeneidad de la enfermedad. Estas características hacen de BAALC un nodo útil para desentrañar mecanismos de mantenimiento de células madre/progenitoras y de señalización hematopoyética aberrante en modelos celulares humanos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO BAALC (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen BAALC en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del BAALC junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de BAALC tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína BAALC.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en BAALC para la investigación de la señalización de BAALC, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de BAALC críticos para la función de BAALC
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de BAALC para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido BAALC CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido BAALC CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus BAALC. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR BAALC (h) y el plásmido HDR BAALC (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología BAALC para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana BAALC definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.