Plásmido Doble Nickase (h) ATAD1: sc-413720-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ATAD1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ATAD1 (h) y el plásmido de doble nickasa ATAD1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ATAD1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ATAD1 | sc-413720-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ATAD1 | sc-413720-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATAD1 (proteína 1 con dominio AAA de la familia de ATPasas) es una ATPasa AAA+ anclada a membrana que se localiza principalmente en la membrana externa mitocondrial, donde contribuye al control de calidad proteico al extraer proteínas de anclaje C‑terminal (tail-anchored) mal localizadas o bloqueadas y coordinar su recambio. Mediante remodelación dependiente de ATP y la comunicación con las vías de ubiquitina–proteasoma, ATAD1 ayuda a mantener la proteostasis mitocondrial, la integridad del orgánulo y la homeostasis celular bajo estrés proteotóxico o metabólico. La alteración de la vigilancia dependiente de ATAD1 puede perturbar la dinámica mitocondrial y la función bioenergética, vinculando a este factor con redes más amplias de respuesta al estrés que influyen en la supervivencia y la diferenciación celulares. La actividad alterada de ATAD1 y los cambios en su número de copias se han investigado en el contexto de la biología tumoral y de fenotipos neurodegenerativos en los que la disfunción mitocondrial es una característica central.
ATAD1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ATAD1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ATAD1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ATAD1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ATAD1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.