AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-419050

Übersicht

Agtr2 kodiert den Angiotensin‑II‑Rezeptor Typ 2 (AT2/AGTR2), einen siebenfach transmembranären GPCR im Renin‑Angiotensin‑System, der zelluläre Antworten auf Angiotensin II moduliert. In Mausgeweben wird die AGTR2‑Signalübertragung häufig mit der Regulation des Gefäßtonus und dem Gewebeumbau in Verbindung gebracht und kann Second‑Messenger‑Signalwege beeinflussen, darunter die Stickstoffmonoxid/cGMP‑Signalgebung, Phosphatase‑Aktivität sowie MAPK‑abhängige Programme, die Proliferation, Apoptose und Differenzierung steuern. Der Rezeptor wird in endothelialen, glatten Muskel‑, neuronalen und renalen Kontexten untersucht, in denen er mit entzündlichen und fibrotischen Prozessen verknüpft ist und AT1‑vermittelte Effekte ausbalanciert. Eine fehlregulierte Angiotensin‑Signalgebung unter Beteiligung von AGTR2 wurde mit der Pathobiologie kardiovaskulärer, renaler und neuroinflammatorischer Erkrankungen assoziiert, was ihn für mechanistische Studien zu Umbau‑ und Stressantwort‑Signalwegen relevant macht.

Das AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Agtr2-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Agtr2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Agtr2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Agtr2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Agtr2-Exone abzielen, die für die AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Agtr2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Agtr2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 HDR-Plasmid (m) und AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Agtr2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Agtr2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.