ASCC1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-417767

Übersicht

ASCC1 (activating signal cointegrator 1 complex subunit 1) ist ein nukleärer Faktor, der an der Transkriptionsregulation und der Erhaltung des Genoms beteiligt ist. Er wirkt im ASC-1/ASCC-Koaktivator-Komplex, der mit der RNA-Polymerase-II-abhängigen Genexpression interagiert. ASCC1 wurde mit zellulären Antworten auf genotoxischen Stress und der Koordination von DNA-Reparatur-assoziierten Prozessen in Verbindung gebracht und unterstützt so eine korrekte Zellzyklusprogression sowie die Proteostase unter Stressbedingungen. Eine Störung der ASCC1-Funktion wurde mit neuromuskulären Krankheitsphänotypen assoziiert, was mit einer essenziellen Rolle bei der Aufrechterhaltung der Gewebehomöostase und von Genexpressionsprogrammen in differenzierten Zellen übereinstimmt. Daher wird ASCC1 in Signalwegen untersucht, die Transkription, DNA-Schadenssignalisierung und stressresponsive regulatorische Netzwerke miteinander verknüpfen.

Das ASCC1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des ASCC1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des ASCC1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von ASCC1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die ASCC1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von ASCC1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der ASCC1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf ASCC1-Exone abzielen, die für die ASCC1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere ASCC1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom ASCC1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom ASCC1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des ASCC1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das ASCC1 HDR-Plasmid (h) und ASCC1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von ASCC1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten ASCC1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.