ARP-1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-405241-LAC

NR2F2 kodiert ARP-1 (auch bekannt als COUP-TFII), einen orphanen nukleären Rezeptor, der als sequenzspezifischer Transkriptionsfaktor fungiert und Zellschicksalsentscheidungen sowie gewebespezifische Genprogramme steuert. ARP-1 ist in Signalwege nukleärer Rezeptoren eingebunden und moduliert die Aktivität von Enhancern und Promotoren, wodurch es Prozesse wie Angiogenese, Organentwicklung, metabolische Regulation und epithelial-mesenchymale Transitionen beeinflusst. Durch kontextabhängige Transkriptionskontrolle ist NR2F2 an Signalwegen beteiligt, die die Gefäßbiologie und entwicklungsbiologische Musterbildung prägen, und wurde in der Literatur mit angeborenen Fehlbildungen sowie mit fehlregulierten Differenzierungszuständen in Verbindung gebracht, die für die Krebsbiologie relevant sind. Diese Eigenschaften machen NR2F2 zu einem nützlichen Knotenpunkt für die Untersuchung transkriptioneller Netzwerke, chromatinregulierter Genexpression und der Linienfestlegung in humanen Zellen.

ARP-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente NR2F2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

ARP-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der NR2F2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen ARP-1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen NR2F2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.