ARMCX1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-407214

Übersicht

ARMCX1 (armadillo repeat containing, X-linked 1) kodiert ein mitochondrienassoziiertes Armadillo-Repeat-Protein, das in Säugerzellen an der Koordination der mitochondrialen Dynamik, des intrazellulären Transports und der Qualitätskontrolle beteiligt ist. Über Interaktionen, die den mitochondrialen Transport sowie das Gleichgewicht zwischen Fusion und Spaltung beeinflussen, kann ARMCX1 die zelluläre Bioenergetik, die Redox-Homöostase und die Anfälligkeit für Apoptose prägen und ist damit mit Stressantwort-Programmen verknüpft. In Neuronen und anderen polarisierten Zelltypen werden ARMCX1-bezogene Mechanismen häufig im Zusammenhang mit der Organellenverteilung entlang zytoskelettaler Netzwerke und deren Einfluss auf das Zellüberleben untersucht. Eine veränderte ARMCX1-Expression wurde in Datensätzen aus der Krebsforschung und der Neurobiologie berichtet, was mechanistische Studien dazu motiviert, wie eine ARMCX1-abhängige Regulation der Mitochondrien zu krankheitsassoziierten Phänotypen beiträgt.

Das ARMCX1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des ARMCX1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des ARMCX1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von ARMCX1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die ARMCX1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von ARMCX1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der ARMCX1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf ARMCX1-Exone abzielen, die für die ARMCX1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere ARMCX1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom ARMCX1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom ARMCX1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des ARMCX1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das ARMCX1 HDR-Plasmid (h) und ARMCX1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von ARMCX1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten ARMCX1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.