ARL15 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-412313

Übersicht

ARL15 (ADP-Ribosylierungsfaktor‑ähnliche GTPase 15) ist eine kleine GTPase der ARF-Familie, die an der Regulation des intrazellulären Membrantransports und der organellassoziierten Signalübertragung beteiligt ist – Prozesse, die das Rezeptor‑Recycling, die Endosomen‑Dynamik und den kompartimentspezifischen Lipidhaushalt beeinflussen. Durch diese Funktionen kann ARL15 den zellulären Stoffwechsel sowie Signaltransduktionswege mitprägen, die von vesikulärem Transport und der Zusammensetzung der Plasmamembran abhängen. Humangenetische Studien haben ARL15‑Loci mit kardiometabolischen Merkmalen in Verbindung gebracht, darunter Phänotypen zu Adipositas und Insulin, was die Untersuchung von ARL15 im Kontext der metabolischen Homöostase und verwandter Krankheitsbiologie unterstützt. Seine Expression und Aktivität lassen sich daher nutzen, um zu untersuchen, wie trafficking‑gekoppelte GTPase‑Signalgebung mit endokrinen Antworten und nährstoffabhängigen zellulären Programmen zusammenspielt.

Das ARL15 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des ARL15-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des ARL15-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von ARL15 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die ARL15-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von ARL15-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der ARL15-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf ARL15-Exone abzielen, die für die ARL15-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere ARL15-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom ARL15 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom ARL15 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des ARL15-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das ARL15 HDR-Plasmid (h) und ARL15 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von ARL15-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten ARL15-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.