Plásmido Doble Nickase (h) ARID2: sc-401863-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ARID2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ARID2 (h) y el plásmido de doble nickasa ARID2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ARID2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ARID2 Anticuerpo (E-3): sc-166117
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ARID2 | sc-401863-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ARID2 | sc-401863-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ARID2 (dominio de interacción rico en AT 2) codifica una subunidad de unión al ADN del complejo PBAF (SWI/SNF) de remodelación de la cromatina dependiente de ATP, que ayuda a posicionar los nucleosomas para regular la transcripción, la actividad de los potenciadores (enhancers) y la accesibilidad de la cromatina. A través de estas funciones, ARID2 contribuye al control de los programas del ciclo celular, la especificación de linaje y las respuestas al daño del ADN al moldear redes de expresión génica en todo el genoma. La pérdida o alteración de ARID2 perturba la regulación epigenética y se ha asociado con estados transcripcionales aberrantes observados en múltiples tipos de tumores, lo que lo convierte en un objetivo útil para estudiar dependencias de la remodelación de la cromatina. ARID2 también se utiliza como factor modelo para analizar mecanismos específicos de PBAF, distintos de los complejos BAF canónicos, en la organización del genoma y el control transcripcional.
ARID2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ARID2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ARID2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ARID2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ARID2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.