ARH1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419017
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ARH1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ARH1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ARH1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419017 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Adprh codifica a ARH1 (hidrolase 1 de ADP-ribosilarginina), uma enzima citosólica que hidrolisa mono-ADP-ribose ligada à arginina em proteínas e ajuda a manter a homeostase da ADP-ribosilação. Ao reverter a mono-ADP-ribosilação, a ARH1 influencia a sinalização de estresse e de dano ao DNA, vias da imunidade inata e a regulação da função proteica por meio da renovação de modificações pós-traducionais. A disrupção do metabolismo de ADP-ribose tem sido associada a respostas inflamatórias alteradas, defeitos na manutenção do genoma e desregulação de programas de sobrevivência celular. Em modelos murinos, Adprh oferece um ponto de entrada acessível para investigar como a ADP-ribosilação reversível da arginina molda a resiliência celular e fenótipos relevantes para doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ARH1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Adprh em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Adprh, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Adprh na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ARH1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Adprh para a investigação da sinalização de ARH1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Adprh críticos para a função ARH1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Adprh para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ARH1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ARH1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Adprh. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ARH1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ARH1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Adprh para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Adprh definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.