ARG1/Arginase 1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (bovine): sc-437305

Panoramica

ARG1/Arginasi 1 codifica un’ureoidrolasi manganese-dipendente che catalizza la conversione della L-arginina in urea e ornitina, agendo come enzima terminale chiave del ciclo dell’urea e come regolatore dello smaltimento dell’azoto. Controllando la biodisponibilità dell’arginina, ARG1 influenza la biosintesi di poliammine e prolina tramite l’ornitina, collega il metabolismo degli amminoacidi alla produzione di collagene e modula la segnalazione dell’ossido nitrico attraverso la competizione con le ossido nitrico sintasi. Nei sistemi bovini, l’attività di ARG1 è rilevante per l’omeostasi metabolica epatica e per i programmi immunometabolici nelle cellule mieloidi, dove il catabolismo dell’arginina può plasmare il tono infiammatorio e il rimodellamento tissutale. Una deplezione di arginina guidata da arginasi e deregolata è stata associata a una compromissione delle funzioni effettrici immunitarie e ad alterate risposte allo stress metabolico, a supporto di studi meccanicistici in modelli di fegato e del sistema immunitario.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO ARG1/Arginase 1 (bovine) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene in linee cellulari bovine. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina ARG1/Arginase 1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di per lo studio della segnalazione di ARG1/Arginase 1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni critici per la funzione di ARG1/Arginase 1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal ARG1/Arginase 1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (bovine) e dal ARG1/Arginase 1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (bovine2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus . Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal ARG1/Arginase 1 Plasmide HDR (bovine) e il plasmide HDR ARG1/Arginase 1 (bovine2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.