Aquaporin 9/AQP9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401298

Visão geral

AQP9 codifica a aquaporina 9, um canal de membrana plasmática do tipo aquagliceroporina que facilita o transporte bidirecional de água e de pequenos solutos, como glicerol, ureia e outros metabólitos neutros. Ao regular o fluxo de glicerol, a AQP9 influencia o equilíbrio energético celular e o metabolismo lipídico, sustentando processos como a gliconeogénese e a homeostase osmótica em tecidos metabolicamente ativos. Em contextos imunitários e epiteliais, alterações na atividade da AQP9 têm sido associadas a mudanças na função de células inflamatórias e na fisiologia de barreira, ligando a sua expressão a vias que acoplam o transporte de membrana a respostas metabólicas e ao stress. Uma expressão desregulada de AQP9 foi reportada em múltiplos cenários relevantes para doenças, incluindo perturbações metabólicas e fenótipos associados ao cancro, nos quais o transporte de solutos pode moldar programas de proliferação e sobrevivência.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Aquaporin 9/AQP9 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene AQP9 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do AQP9, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do AQP9 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Aquaporin 9/AQP9.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de AQP9 para a investigação da sinalização de Aquaporin 9/AQP9, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) AQP9 críticos para a função Aquaporin 9/AQP9
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos AQP9 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Aquaporin 9/AQP9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Aquaporin 9/AQP9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus AQP9. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Aquaporin 9/AQP9 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Aquaporin 9/AQP9 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia AQP9 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo AQP9 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.