Plasmide CRISPR/Cas9 KO Aquaporin 7/AQP7 (m): sc-419178
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Aquaporin 7/AQP7 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Aquaporin 7/AQP7, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Aquaporin 7/AQP7 Antibody (D-12): sc-376407
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Aquaporin 7/AQP7 (m) | sc-419178 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Aqp7 code l’aquaporine 7 (AQP7), une aquaglycéroporine qui facilite le transport membranaire de l’eau et de petits solutés neutres tels que le glycérol. Dans les adipocytes de souris, AQP7 contribue à réguler l’efflux de glycérol lors de la lipolyse, influençant l’utilisation du glycérol, le stockage des triglycérides et l’équilibre énergétique systémique. Son activité s’inscrit dans des programmes de signalisation métabolique incluant les voies lipolytiques dépendantes de l’AMPc/PKA et, plus largement, des réseaux d’homéostasie lipidique. Des altérations de l’expression ou de la fonction d’AQP7 ont été associées à des phénotypes pertinents pour l’obésité, la résistance à l’insuline et l’accumulation de lipides hépatiques, ce qui en fait un nœud mécanistique utile dans les modèles de maladies métaboliques.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Aquaporin 7/AQP7 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Aqp7 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Aqp7, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Aqp7 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Aquaporin 7/AQP7.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Aqp7 pour l'étude de la signalisation de Aquaporin 7/AQP7, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Aqp7 essentiels à la fonction de Aquaporin 7/AQP7
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Aqp7 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Aquaporin 7/AQP7 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Aquaporin 7/AQP7 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Aqp7. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Aquaporin 7/AQP7 plasmide HDR (m) et le Aquaporin 7/AQP7 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Aqp7 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Aqp7 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.