Aquaporin 1/AQP1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400340-LAC

Human AQP1 kodiert Aquaporin 1, einen tetrameren Membran-Wasserkanal, der einen schnellen osmotischen Wassertransport über Plasmamembranen und spezialisierte Barrieren ermöglicht. AQP1 trägt zur Flüssigkeitshomöostase und zur mikrovaskulären Permeabilität bei und ist in Prozesse wie endothelialen Transport, Zellvolumenregulation und den Flüssigkeitshaushalt von Geweben eingebunden. Über den Wasserfluss hinaus wurde AQP1 in bestimmten Kontexten mit Zellmigration und angiogenen Eigenschaften in Verbindung gebracht, wodurch die Kanalaktivität mit der Zytoskelettdynamik und Interaktionen mit der extrazellulären Mikroumgebung verknüpft wird. Eine dysregulierte AQP1-Expression oder -Lokalisation wurde bei Erkrankungen mit gestörter Flüssigkeitsregulation und beeinträchtigter Gefäßbarrierefunktion beschrieben, was seinen Nutzen als Forschungsziel in der Ödem-Biologie, der Nieren- und Lungenphysiologie sowie in Studien zum Tumormikromilieu unterstreicht.

Aquaporin 1/AQP1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente AQP1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Aquaporin 1/AQP1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der AQP1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Aquaporin 1/AQP1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen AQP1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.