apoD Lentiviral Activation Particles (h): sc-402012-LAC

Das humane Gen **APOD** kodiert Apolipoprotein D (apoD), ein sezerniertes Lipocalin, das kleine hydrophobe Liganden wie Arachidonsäure, Progesteron und cholesterinbezogene Lipide bindet und transportiert. ApoD ist an Lipidtransportprozessen und am Lipoproteinstoffwechsel beteiligt und beeinflusst das zelluläre Redoxgleichgewicht, indem es die Lipidperoxidation begrenzt und Reaktionen auf oxidativen Stress moduliert. Es wird in mehreren Geweben exprimiert, mit besonders wichtigen Funktionen im Nervensystem, und wird häufig im Zusammenhang mit Alterung, Neuroinflammation, Neurodegeneration und metabolischer Dysregulation untersucht, bei denen eine veränderte Lipidverarbeitung und oxidative Schädigung eine Rolle spielen. Die APOD-Aktivität überschneidet sich mit Signalwegen der Membranremodellierung, der inflammatorischen Signalübertragung und stressadaptiven Genprogrammen, die für Krankheitsmechanismen relevant sind, ohne dabei einen therapeutischen Nutzen zu implizieren.

apoD Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente APOD-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

apoD Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der APOD-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen apoD-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen APOD-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.