apoC1 Double Nickase Plasmid (h): sc-403713-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das apoC1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- apoC1 Double-Nickase-Plasmid (h) und apoC1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf APOC1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
apoC1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-403713-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
apoC1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-403713-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
APOC1 kodiert Apolipoprotein C‑I (ApoC1), ein kleines sezerniertes Apolipoprotein, das vor allem mit HDL und VLDL assoziiert ist und das Lipoprotein-Remodeling sowie den rezeptorvermittelten Lipidtransport moduliert. ApoC1 beeinflusst den Metabolismus triglyceridreicher Plasmalipoproteine, indem es Interaktionen mit Lipoproteinrezeptoren und Lipasen reguliert und dadurch die Verarbeitung von Cholesterin und Triglyceriden in hepatischen und peripheren Geweben mitprägt. Aufgrund seiner Funktionen im Lipidtransport und in der Wechselwirkung mit inflammatorischen Signalwegen wird APOC1 häufig in Zusammenhängen untersucht, die mit Atherosklerose, metabolischer Dyslipidämie und der Biologie von Makrophagen verbunden sind. Veränderte APOC1-Expression wurde zudem in neuroinflammatorischen Kontexten und in tumorassoziierten myeloiden Programmen untersucht, in denen der Lipidstoffwechsel zelluläre Zustandsänderungen unterstützt.
apoC1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des APOC1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von APOC1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die APOC1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit APOC1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.