apoC-I Double Nickase Plasmid (m): sc-419163-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das apoC-I Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- apoC-I Double-Nickase-Plasmid (m) und apoC-I Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Apoc1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
apoC-I Double Nickase Plasmid (m) | sc-419163-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
apoC-I Double Nickase Plasmid (m2) | sc-419163-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Apolipoprotein C-I (apoC-I), kodiert durch das Mausgen Apoc1, ist ein kleines, sekretiertes Apolipoprotein, das besonders auf triglyceridreichen Lipoproteinen und HDL angereichert ist und den Transport sowie die Clearance von Plasmalipiden moduliert. Es beeinflusst das Remodeling von Lipoproteinen und die rezeptorvermittelte Aufnahme, indem es die Lipaseaktivität und die Interaktionen mit hepatischen Rezeptoren reguliert, und verknüpft Apoc1 damit mit Signalwegen der Triglycerid‑Metabolisierung, des Cholesterintransports und der systemischen Energiebilanz. In Makrophagen und anderen myeloischen Kompartimenten ist die Apoc1-Expression mit Programmen der Lipidverarbeitung und entzündlichen Signalnetzwerken assoziiert, die die Biologie von Schaumzellen prägen. Dysregulierte apoC-I-Spiegel oder eine veränderte Aktivität des Apoc1-Lokus wurden im Zusammenhang mit Stoffwechselstörungen und atherosklerosebezogenen Prozessen untersucht und stützen mechanistische Forschung zu lipidgetriebener Entzündung.
apoC-I Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Apoc1-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Apoc1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Apoc1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Apoc1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.