Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
apoB Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-433607
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- apoB El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico apoB, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: apoB Anticuerpo (A-6): sc-393636
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
apoB Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-433607 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen **Apob** de ratón codifica la apolipoproteína B (apoB), la apolipoproteína estructural esencial necesaria para el ensamblaje y la secreción de lipoproteínas ricas en triglicéridos, incluidos los quilomicrones y las VLDL, y para la formación posterior de LDL. La apoB coordina la biogénesis de lipoproteínas en el retículo endoplásmico mediante interacciones con la proteína microsomal de transferencia de triglicéridos, vinculando el manejo hepático e intestinal de lípidos con el transporte sistémico de colesterol. Al gobernar el número y la composición de las partículas, la apoB influye en la interacción con receptores de lipoproteínas, la captación de lípidos y la señalización metabólica posterior. La desregulación de las vías dependientes de **APOB** se utiliza ampliamente para modelar en ratones la hiperlipidemia, fenotipos de hígado graso y el tráfico lipídico relevante para la aterosclerosis.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO apoB (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Apob en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Apob junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Apob tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína apoB.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Apob para la investigación de la señalización de apoB, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Apob críticos para la función de apoB
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Apob para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido apoB CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido apoB CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Apob. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR apoB (m) y el plásmido HDR apoB (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Apob para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Apob definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.