apoA-II Double Nickase Plasmid (h): sc-404987-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das apoA-II Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- apoA-II Double-Nickase-Plasmid (h) und apoA-II Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf APOA2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: apoA-II: sc-101261
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
apoA-II Double Nickase Plasmid (h) | sc-404987-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
apoA-II Double Nickase Plasmid (h2) | sc-404987-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
APOA2 kodiert Apolipoprotein A‑II (ApoA‑II), einen wichtigen strukturellen Bestandteil von High-Density-Lipoprotein (HDL), der die Stabilität von Lipoproteinpartikeln, die Lipidbindung und deren Umbau im Blutkreislauf moduliert. ApoA‑II beeinflusst zentrale Schritte der Cholesterin- und Triglyceridverarbeitung, indem es Wechselwirkungen mit Lipidtransfer- und lipolytischen Faktoren beeinflusst und dadurch den reversen Cholesterintransport sowie weitere lipidstoffwechselrelevante Signal- und Stoffwechselwege prägt. Veränderungen in der Expression oder Sequenz von APOA2 wurden mit veränderten Lipidprofilen im Plasma und einem erhöhten Risiko für kardiometabolische Merkmale in Verbindung gebracht, was seine Rolle als mechanistischer Knotenpunkt in Studien zu Dyslipidämie und metabolischer Homöostase unterstützt. In‑vitro- und In‑vivo-Modelle, die auf ApoA‑II abzielen, ermöglichen die Untersuchung der HDL-Zusammensetzung, des Lipidflusses sowie nachgeschalteter entzündlicher oder oxidativer Prozesse, die mit der Atherosklerose-Biologie verknüpft sind.
apoA-II Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des APOA2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von APOA2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die APOA2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit APOA2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.