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AP-2μ1双切口酶质粒(h) | sc-403095-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
AP-2μ1双切口酶质粒(h2) | sc-403095-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AP2M1 编码适配蛋白2(AP-2)复合体的 µ1 亚基,是质膜上网格蛋白介导内吞作用的核心组分。AP-2µ1 能识别货物蛋白的分选基序,并协调网格蛋白包被的组装,从而调控受体、转运体及其他膜蛋白的内吞与回收。通过控制囊泡运输,AP2M1 影响信号衰减、营养摄取和突触囊泡动力学,并与受体酪氨酸激酶及 GPCR 的转运等通路相关。内吞适配子功能失调与神经与代谢稳态改变有关,在肿瘤细胞信号传导、神经发育表型以及膜蛋白周转的研究中也经常涉及。
AP-2μ1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 AP2M1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对AP2M1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏AP2M1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了AP2M1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。