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Annexin IV双切口酶质粒(h) | sc-402134-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Annexin IV双切口酶质粒(h2) | sc-402134-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ANXA4 编码 annexin IV,这是一种 Ca²⁺ 依赖性的磷脂结合蛋白,可与质膜及内膜系统的胞质侧膜叶结合,从而调控膜的组织、曲率以及囊泡运输。Annexin IV 参与 Ca²⁺ 响应性信号传导与细胞骨架动态变化,影响胞吐、胞吞和上皮离子转运等过程,并被认为与膜修复调控及细胞应激反应有关。已有研究报道 ANXA4 的表达在多种肿瘤类型及炎症相关疾病中发生改变,并常被用于探讨其在细胞存活、迁移以及药物反应表型中的作用。这些特性使 ANXA4 成为解析与上皮生物学及癌细胞行为相关的膜相关通路的有用靶点。
Annexin IV 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ANXA4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ANXA4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ANXA4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ANXA4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。