Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Annexin-2/ANXA2 Double Nickase Plasmid (h): sc-400296-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Annexin-2/ANXA2 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Annexin-2/ANXA2 Double-Nickase-Plasmid (h) und Annexin-2/ANXA2 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf ANXA2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Annexin-2/ANXA2: sc-28385
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Annexin-2/ANXA2 Double Nickase Plasmid (h) | sc-400296-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Annexin-2/ANXA2 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-400296-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ANXA2 kodiert Annexin A2, ein Ca²⁺-abhängiges, phospholipidbindendes Protein, das mit der Plasmamembran und dem kortikalen Aktin assoziiert und so Membrantransport, Zytoskelett-Remodelling und Zellmotilität koordiniert. Annexin A2 wirkt in Komplexen mit S100A10 und unterstützt die Plasminbildung sowie perizelluläre Proteolyse, wodurch es mit dem Umbau der extrazellulären Matrix und wundassoziierten Signalwegen verknüpft ist. Es trägt zu Endozytose/Exozytose, zur Organisation von Lipid-Rafts und zur Regulation fibrinolytischer und inflammatorischer Signalwege bei. Eine dysregulierte ANXA2-Expression oder -Lokalisation wurde bei mehreren Tumortypen sowie bei vaskulären und entzündlichen Erkrankungen beschrieben, was ANXA2 zu einem nützlichen Knotenpunkt für die Untersuchung von Invasion, angiogenen Antworten und stressadaptiver Membrandynamik macht.
Annexin-2/ANXA2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des ANXA2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von ANXA2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die ANXA2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit ANXA2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.