Angptl2 Lentiviral Activation Particles (m): sc-424003-LAC

Maus-Angiopoietin-like 2 (Angptl2) ist ein sezerniertes Glykoprotein, das die Gefäß- und Stromabiologie moduliert, indem es das Verhalten von Endothelzellen, den Umbau der extrazellulären Matrix und Gewebeentzündungen beeinflusst. Es wird häufig mit proinflammatorischen Signalnetzwerken in Verbindung gebracht, einschließlich NF-κB-assoziierter Transkriptionsprogramme, und kann die Rekrutierung von Leukozyten sowie die Aktivierung von Makrophagen in geschädigten oder metabolisch gestressten Geweben steuern. Eine Angptl2-Expression wurde mit Funktionsstörungen des Fettgewebes, insulinresistenz-assoziierten Entzündungszuständen, vaskulärem Remodeling und Veränderungen der tumorassoziierten Mikroumgebung in Zusammenhang gebracht, wodurch es für Studien zu chronischer Entzündung und fibroseähnlichen Prozessen relevant ist. Als zirkulierender oder lokal parakriner Faktor wird Angptl2 häufig hinsichtlich seiner Effekte auf die Zell-Zell-Kommunikation sowie die Zytokin-/Chemokin-Signalübertragung in organspezifischen Verletzungsmodellen untersucht.

Angptl2 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Angptl2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Angptl2 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Angptl2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Angptl2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Angptl2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.