Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Angiotensinogen Double Nickase Plasmid (h): sc-401013-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Angiotensinogen Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Angiotensinogen Double-Nickase-Plasmid (h) und Angiotensinogen Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf AGT abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Angiotensinogen: sc-374511
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Angiotensinogen Double Nickase Plasmid (h) | sc-401013-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Angiotensinogen Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401013-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das menschliche Gen **AGT** kodiert Angiotensinogen, die in der Leber gebildete Vorstufe der Angiotensinpeptide, die das Renin–Angiotensin-System (RAS) antreiben. Durch proteolytische Prozessierung via Renin und Angiotensin-Converting Enzyme entsteht Angiotensin II, ein zentraler Effektor, der Gefäßtonus, Natrium- und Wasserhomöostase sowie endokrine Signalübertragung über AT1-/AT2-Rezeptorwege reguliert. Nachgeschaltete Signalwege überschneiden sich mit der Kalziummobilisierung, MAPK-Kaskaden, oxidativen Stressantworten und Transkriptionsprogrammen, die Gefäßremodellierung und entzündliche Prozesse prägen. Eine fehlregulierte AGT-/RAS-Aktivität ist breit untersucht in der Hypertonie-Biologie, der kardiovaskulären und renalen Pathophysiologie, metabolischem Stress sowie fibroseassoziierter Signalgebung in mehreren Geweben.
Angiotensinogen Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des AGT-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von AGT abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die AGT-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit AGT-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.