Angiotensinogen CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-419047

Übersicht

Mouse Agt kodiert Angiotensinogen, ein von der Leber gebildetes und sezerniertes Glykoprotein, das als Vorläufer der Angiotensinpeptide im Renin‑Angiotensin‑System (RAS) dient. Durch proteolytische Verarbeitung durch Renin und das Angiotensin‑konvertierende Enzym entstehen bioaktive Angiotensine, die den Gefäßtonus, die Natrium‑ und Flüssigkeitshomöostase sowie die endokrine Signalübertragung in Niere, Nebenniere, Herz und Gehirn regulieren. Die durch Angiotensinogen vermittelte RAS‑Aktivität überschneidet sich mit Entzündungs‑ und oxidativen Stresssignalwegen und beeinflusst über Angiotensin‑II‑Signale Gewebeumbau und Fibrose. Eine dysregulierte Agt‑Expression oder ‑Prozessierung wird in Mausmodellen häufig als mechanistischer Ansatzpunkt genutzt, um kardiovaskuläre und renale Pathophysiologie, metabolische Stressreaktionen und die Organ‑Cross‑talk‑Mechanismen zu untersuchen.

Das Angiotensinogen CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Agt-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Agt-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Agt nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Angiotensinogen-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Agt-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Angiotensinogen-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Agt-Exone abzielen, die für die Angiotensinogen-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Agt-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Angiotensinogen CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Angiotensinogen CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Agt-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Angiotensinogen HDR-Plasmid (m) und Angiotensinogen HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Agt-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Agt-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.