Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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alpha 1 Sodium Potassium ATPase/ATP1A1 Double Nickase Plasmid (h): sc-400239-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das alpha 1 Sodium Potassium ATPase/ATP1A1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- alpha 1 Sodium Potassium ATPase/ATP1A1 Double-Nickase-Plasmid (h) und alpha 1 Sodium Potassium ATPase/ATP1A1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf ATP1A1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: alpha 1 Sodium Potassium ATPase/ATP1A1: sc-21712
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
alpha 1 Sodium Potassium ATPase/ATP1A1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-400239-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
alpha 1 Sodium Potassium ATPase/ATP1A1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-400239-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATP1A1 kodiert die katalytische α1‑Untereinheit der Na⁺/K⁺‑ATPase, einer essenziellen P‑Typ‑ATPase, die durch ATP‑Hydrolyse Na⁺ aus der Zelle exportiert und K⁺ über die Plasmamembran in die Zelle importiert. Durch die Aufrechterhaltung ionischer Gradienten unterstützt ATP1A1 das Ruhemembranpotenzial, die Kontrolle des Zellvolumens, den sekundär aktiven Transport sowie die Erregbarkeit und beeinflusst Signalwege, die mit Zelladhäsion, Zytoskelettorganisation und Stressantworten verknüpft sind. Die Aktivität der α1‑Na⁺/K⁺‑ATPase ist zentral für die Physiologie von Epithel- und Nervenzellen und trägt zu Programmen der Ionenhomöostase bei, die den metabolischen Bedarf und die Ca²⁺‑Handhabung mitbestimmen. Eine fehlregulierte Funktion oder Expression von ATP1A1 wurde in krankheitsrelevanten Kontexten mit veränderter Erregbarkeit und Transportphänotypen in Verbindung gebracht, wodurch es sich als geeigneter Knotenpunkt für die Untersuchung der Membranphysiologie und des Signalweg‑Cross‑Talks anbietet.
alpha 1 Sodium Potassium ATPase/ATP1A1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des ATP1A1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von ATP1A1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die ATP1A1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit ATP1A1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.