Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO AGPS (m): sc-432759
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- AGPS Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique AGPS, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: AGPS Antibody (A-2): sc-374201
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO AGPS (m) | sc-432759 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Agps code l’alkylglycérone phosphate synthase (AGPS), une enzyme peroxysomale qui catalyse une étape clé de formation de la liaison éther lors de la biosynthèse des plasmalogènes. En contrôlant les réserves cellulaires de phospholipides éther, AGPS contribue à l’architecture membranaire, à la composition des radeaux lipidiques et au tamponnement rédox grâce à la capacité antioxydante associée aux plasmalogènes. Le remodelage lipidique dépendant d’AGPS influence le couplage métabolique peroxysome–réticulum endoplasmique et, plus largement, l’homéostasie des glycérophospholipides. La perturbation du métabolisme des lipides éther est impliquée dans des phénotypes métaboliques liés aux peroxysomes et des dysfonctionnements du neurodéveloppement, ce qui étaye l’utilisation de la perturbation d’Agps pour modéliser, chez la souris, des défauts lipidiques à l’échelle d’une voie métabolique.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO AGPS (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Agps dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Agps, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Agps à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine AGPS.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Agps pour l'étude de la signalisation de AGPS, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Agps essentiels à la fonction de AGPS
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Agps pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le AGPS plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le AGPS plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Agps. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le AGPS plasmide HDR (m) et le AGPS (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Agps pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Agps définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.