ADM2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403726

Descripción general

ADM2 (adrenomedulina 2; también conocida como intermedina) codifica una hormona peptídica secretada de la familia del péptido relacionado con el gen de la calcitonina, que señaliza a través de CLR (CALCRL) junto con correceptores RAMP para modular respuestas dependientes de cAMP/PKA. ADM2 contribuye a la regulación del tono vascular, la función de las células endoteliales y del músculo liso, la homeostasis hidroelectrolítica y la señalización sensible al estrés en la fisiología cardiovascular y renal. En contextos celulares, ADM2 puede influir en programas angiogénicos, vías relacionadas con el óxido nítrico y el equilibrio de mediadores inflamatorios, integrando señales paracrinas/autocrinas con la señalización de GPCR. La señalización desregulada de ADM2 se ha asociado en la literatura con disfunción cardiometabólica y vascular, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos en modelos de investigación cardiovascular, renal e inmunometabólica.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ADM2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ADM2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ADM2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ADM2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ADM2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ADM2 para la investigación de la señalización de ADM2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ADM2 críticos para la función de ADM2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ADM2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ADM2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ADM2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ADM2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ADM2 (h) y el plásmido HDR ADM2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ADM2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ADM2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.