Plásmido Doble Nickase (h) Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3: sc-400407-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 (h) y el plásmido de doble nickasa Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ADCY3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 | sc-400407-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 | sc-400407-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La ADCY3 humana (adenilato ciclasa 3, AC3) es una adenilil ciclasa asociada a membrana que cataliza la conversión de ATP a AMPc aguas abajo de la señalización de los GPCR. Al controlar programas de fosforilación dependientes de AMPc/PKA, ADCY3 influye en la señalización sensorial, la excitabilidad celular y las respuestas transcripcionales mediadas por CREB y otros efectores sensibles al AMPc. La actividad de AC3 contribuye a dinámicas compartimentalizadas de segundos mensajeros que moldean procesos metabólicos y neuroendocrinos, incluida la regulación hipotalámica del balance energético. Estudios genéticos y funcionales han vinculado la desregulación de ADCY3 o ciertas variantes con fenotipos de señalización de AMPc alterados y rasgos relevantes para enfermedad, como la obesidad y disfunciones metabólicas relacionadas, lo que respalda su uso como un nodo mecanístico en la investigación de la vía GPCR–AMPc.
Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ADCY3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ADCY3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ADCY3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ADCY3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.