Adenosine A2A-R Lentiviral Activation Particles (h): sc-400807-LAC

ADORA2A kodiert den humanen Adenosin‑A2A‑Rezeptor (A2A‑R), einen G‑Protein‑gekoppelten Rezeptor, der hauptsächlich über Gs signalisiert, um cAMP zu erhöhen und PKA‑ sowie CREB‑abhängige Transkriptionsprogramme zu aktivieren. A2A‑R integriert extrazelluläre Adenosin‑Signale in neuromodulatorische und immunregulatorische Schaltkreise und beeinflusst dadurch Prozesse wie Neurotransmitterfreisetzung, synaptische Plastizität und die Produktion inflammatorischer Mediatoren. Die Rezeptoraktivität überschneidet sich mit MAPK/ERK‑Signalwegen, der Calciumhomöostase und der Regulation von Zytokinnetzwerken und verknüpft die ADORA2A‑Expression so mit Stressantworten und Veränderungen des Gewebemikromilieus. Eine fehlregulierte ADORA2A‑Signalgebung wurde unter anderem im Zusammenhang mit Neuroinflammation, Neurodegeneration und tumorassoziierter Immunsuppression untersucht, was sie für Pathway‑Mapping und die mechanistische Validierung von Targets in humanen Zellmodellen relevant macht.

Adenosine A2A-R Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente ADORA2A-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Adenosine A2A-R Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der ADORA2A-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Adenosine A2A-R-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen ADORA2A-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.