Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ADAR1 Double Nickase Plasmid (m): sc-425147-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das ADAR1 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- ADAR1 Double-Nickase-Plasmid (m) und ADAR1 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Adar abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: ADAR1: sc-73408
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
ADAR1 Double Nickase Plasmid (m) | sc-425147-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ADAR1 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-425147-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das murine **Adar**-Gen kodiert **ADAR1**, eine auf RNA wirkende Adenosindesaminase, die in doppelsträngigen RNA-Strukturen eine **A‑zu‑I‑Editierung** katalysiert und dadurch Transkriptsequenzen, Spleißmuster und die RNA‑Stabilität verändert. ADAR1 ist ein zentraler Modulator der angeborenen Immunhomöostase, indem es die fehlerhafte Erkennung endogener dsRNA begrenzt und Programme interferonstimulierter Gene sowie RNA‑Sensorik‑Signalwege wie **MDA5/MAVS** beeinflusst. Über diese Funktionen trägt es zur posttranskriptionellen Regulation, zu Stressantworten und zur Kontrolle immunogener Nukleinsäuren bei und ist damit relevant für Studien zur Neuroentwicklung, zu entzündungsassoziierten Phänotypen und zur Tumor‑Immun‑Signalgebung. Veränderte ADAR1‑Aktivität und RNA‑Editierungslandschaften werden in experimentellen Modellen häufig als molekulare Readouts für eine dysregulierte RNA‑Metabolisierung und Immunaktivierung verwendet.
ADAR1 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Adar-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Adar abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Adar-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Adar-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.