ADAMTS-7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-403381

Übersicht

ADAMTS7 kodiert ADAMTS-7, eine sekretierte Metalloprotease der ADAMTS-Familie, die die extrazelluläre Matrix durch proteolytische Verarbeitung von Matrixbestandteilen und assoziierten Proteinen umbaut. In menschlichen Geweben beeinflusst die Aktivität von ADAMTS-7 Zell–Matrix-Interaktionen, das Verhalten glatter Gefäßmuskelzellen sowie Matrix-Turnover-Mechanismen, die Gewebearchitektur und entzündliches Remodeling prägen. Eine dysregulierte Expression oder Aktivität von ADAMTS7 wurde mit Gefäßpathologien und atheroskleroseassoziierten Prozessen in Verbindung gebracht; veränderte Dynamiken der extrazellulären Matrix können zudem mit fibrotischen und degenerativen Gewebereaktionen zusammenhängen. Diese Eigenschaften machen ADAMTS-7 zu einem geeigneten Ziel für die Untersuchung der extrazellulären Proteostase, der Matrixsignalgebung und krankheitsrelevanter Remodeling-Phänotypen in zellbasierten und mechanistischen Modellen.

Das ADAMTS-7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des ADAMTS7-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des ADAMTS7-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von ADAMTS7 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die ADAMTS-7-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von ADAMTS7-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der ADAMTS-7-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf ADAMTS7-Exone abzielen, die für die ADAMTS-7-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere ADAMTS7-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom ADAMTS-7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom ADAMTS-7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des ADAMTS7-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das ADAMTS-7 HDR-Plasmid (h) und ADAMTS-7 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von ADAMTS7-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten ADAMTS7-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.