ADAM11 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418982

Descripción general

Adam11 codifica ADAM11, una proteína de la familia ADAM tipo desintegrina, catalíticamente inactiva, implicada en las interacciones célula–célula y célula–matriz, con funciones destacadas en el sistema nervioso. ADAM11 se asocia con procesos como la diferenciación neuronal, la organización de las sinapsis y la modulación de la señalización dependiente de la adhesión a través de sus dominios extracelulares. Se han descrito alteraciones en la expresión de ADAM11 y cambios genómicos en estudios de fenotipos del neurodesarrollo y neurodegenerativos, y también se investiga en el contexto de la biología tumoral, donde los programas de adhesión y migración están desregulados. Como gen de ratón, Adam11 proporciona un sistema manejable para desentrañar mecanismos conservados mediados por ADAM en los circuitos neuronales y la remodelación tisular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ADAM11 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Adam11 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Adam11 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Adam11 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ADAM11.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Adam11 para la investigación de la señalización de ADAM11, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Adam11 críticos para la función de ADAM11
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Adam11 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ADAM11 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ADAM11 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Adam11. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ADAM11 (m) y el plásmido HDR ADAM11 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Adam11 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Adam11 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.