ACTR6 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-426328

Panoramica

Actr6 codifica la proteina 6 correlata all’actina (ACTR6), un fattore nucleare actina-correlato che opera all’interno di complessi regolatori della cromatina per sostenere il rimodellamento dei nucleosomi e il controllo della trascrizione. L’attività di ACTR6 contribuisce all’organizzazione dell’architettura di promotori ed enhancer e influenza l’accessibilità del DNA durante processi quali le risposte allo stress replicativo e la riparazione del danno al DNA. Attraverso i suoi effetti sulla dinamica della cromatina, Actr6 può modulare la progressione del ciclo cellulare, la specificazione di linea e i programmi di stabilità del genoma. Un rimodellamento della cromatina deregolato è ampiamente implicato in anomalie dello sviluppo e in stati trascrizionali oncogenici, rendendo Actr6 un nodo utile per lo studio di meccanismi epigenetici rilevanti per la malattia.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO ACTR6 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Actr6 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Actr6 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Actr6 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina ACTR6.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Actr6 per lo studio della segnalazione di ACTR6, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Actr6 critici per la funzione di ACTR6
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Actr6 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal ACTR6 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal ACTR6 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Actr6. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal ACTR6 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR ACTR6 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Actr6 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Actr6 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.