ACTR6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-426328

Descripción general

Actr6 codifica la proteína 6 relacionada con la actina (ACTR6), un factor nuclear relacionado con la actina que actúa dentro de complejos reguladores de la cromatina para apoyar la remodelación de nucleosomas y el control transcripcional. La actividad de ACTR6 contribuye a la organización de la arquitectura de promotores y potenciadores (enhancers) e influye en la accesibilidad del ADN durante procesos como las respuestas al estrés replicativo y la reparación del daño en el ADN. A través de sus efectos sobre la dinámica de la cromatina, Actr6 puede modular la progresión del ciclo celular, la especificación de linaje y los programas de estabilidad genómica. La remodelación desregulada de la cromatina está ampliamente implicada en anomalías del desarrollo y en estados transcripcionales oncogénicos, lo que convierte a Actr6 en un nodo útil para estudiar mecanismos epigenéticos relevantes para la enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ACTR6 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Actr6 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Actr6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Actr6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ACTR6.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Actr6 para la investigación de la señalización de ACTR6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Actr6 críticos para la función de ACTR6
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Actr6 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ACTR6 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ACTR6 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Actr6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ACTR6 (m) y el plásmido HDR ACTR6 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Actr6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Actr6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.