ACTR-I CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-418974

개요

Acvr1은 TGF-β 슈퍼패밀리에 속하는 I형 세린/트레오닌 키나아제 수용체인 activin A receptor type I(ACTR-I/ALK2)를 암호화하며, BMP 및 activin 리간드를 하위의 SMAD1/5/8과 SMAD 의존적 전사 프로그램으로 전달합니다. 마우스 세포에서 ACTR-I는 수용체 복합체 신호를 맥락 의존적 피드백 조절자들과 통합함으로써 발생 패터닝, 골형성 및 연골형성 분화, 그리고 조직 항상성의 조절에 기여합니다. ACVR1 경로의 교란은 조절되지 않은 BMP 신호와 비정상적인 세포 운명 결정과 연관되어 있어, 골격 생물학, 섬유화 유사 리모델링, 그리고 MAPK 및 PI3K/AKT 경로와의 신호전달 크로스토크 연구에 중요합니다. Acvr1 기능에 대한 실험적 검증은 생리적 및 질환 모델 맥락에서 수용체 키나아제 활성, 리간드 특이성, 그리고 하위 전사 네트워크에 대한 기전 연구를 뒷받침합니다.

ACTR-I CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Acvr1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Acvr1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Acvr1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 ACTR-I 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 ACTR-I 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Acvr1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• ACTR-I 기능에 중요한 Acvr1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Acvr1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• ACTR-I CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 ACTR-I CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Acvr1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  ACTR-I HDR 플라스미드 (m) 및 ACTR-I HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Acvr1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Acvr1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.