ACSL3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403546-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ACSL3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ACSL3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ACSL3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ACSL3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ACSL3 Anticorpo (H-9): sc-166374
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ACSL3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403546-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ACSL3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403546-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACSL3 (membro 3 da família das acil-CoA sintetases de cadeia longa) é uma enzima associada ao retículo endoplasmático que ativa ácidos graxos de cadeia longa, convertendo-os em tioésteres de acil-CoA — uma etapa necessária para a biossíntese de lipídios e para a utilização de ácidos graxos. Ao direcionar ácidos graxos para a produção de fosfolipídios e lipídios neutros, a ACSL3 influencia a remodelação de membranas, a biogênese de gotículas lipídicas e programas metabólicos mais amplos ligados ao crescimento celular e à adaptação ao estresse. Sua atividade se integra a vias que regulam a captação de ácidos graxos, a homeostase lipídica do RE e o suprimento de lipídios às mitocôndrias, moldando a bioenergética e a disponibilidade de lipídios sinalizadores. Alterações na regulação da ACSL3 têm sido investigadas em contextos de reprogramação metabólica, inflamação associada a lipídios e transformação oncogênica, nos quais a ativação de ácidos graxos pode contribuir para perfis lipídicos que definem o fenótipo.
ACSL3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ACSL3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ACSL3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ACSL3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ACSL3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.