Acrp30 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-418962

Übersicht

Adipoq kodiert Acrp30 (Adiponectin), ein von Adipozyten sezerniertes Hormon, das als Multimere im Blut zirkuliert und die systemische Energiebilanz reguliert. Acrp30 signalisiert vor allem über ADIPOR1/ADIPOR2 und moduliert dadurch AMPK- und PPARα-Signalwege; es beeinflusst die Fettsäureoxidation, die Glukoseverwertung und die mitochondriale Biogenese und kann über Effekte auf NF-κB-assoziierte Signalübertragung auch den inflammatorischen Grundton prägen. In Mausmodellen ist eine veränderte Adipoq-Expression mit einer Dysfunktion des Fettgewebes, Insulinresistenz, hepatischer Steatose und atheroskleroseassoziierten Phänotypen verknüpft. Diese Eigenschaften machen Adipoq zu einem zentralen Knotenpunkt für die Untersuchung der Adipokin-Signalgebung, des metabolischen Crosstalks zwischen Fettgewebe und Leber/Muskel sowie der Integration von Entzündung und Stoffwechsel.

Das Acrp30 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Adipoq-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Adipoq-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Adipoq nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Acrp30-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Adipoq-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Acrp30-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Adipoq-Exone abzielen, die für die Acrp30-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Adipoq-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Acrp30 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Acrp30 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Adipoq-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Acrp30 HDR-Plasmid (m) und Acrp30 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Adipoq-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Adipoq-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.