Acrosin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418952
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Acrosin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Acrosin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Acrosin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-418952 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Acr do camundongo codifica a acrosina, uma protease de serina do tipo tripsina armazenada no acrossomo do espermatozoide na forma de zimogênio (proacrosina) e ativada durante a reação acrossômica. A acrosina contribui para a remodelação proteolítica na cabeça do espermatozoide e auxilia a penetração na zona pelúcida, integrando-se a processos que regulam a capacitação espermática, a exocitose acrossômica e as interações entre as membranas dos gametas. Alterações na atividade da acrosina estão associadas a defeitos na competência de fertilização e são usadas como ponto de entrada mecanístico para o estudo da biologia reprodutiva masculina. Como parte da rede mais ampla de proteases de serina, a acrosina fornece um modelo de ativação regulada de zimogênios e de proteólise associada à matriz extracelular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Acrosin (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Acr em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Acr, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Acr na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Acrosin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Acr para a investigação da sinalização de Acrosin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Acr críticos para a função Acrosin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Acr para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Acrosin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Acrosin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Acr. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Acrosin Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Acrosin (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Acr para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Acr definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.