Abin-1 Lentiviral Activation Particles (m): sc-425441-LAC

Das Mausgen **Tnip1** kodiert **ABIN-1** (A20-bindender Inhibitor von NF-κB), einen ubiquitinbindenden Adapter, der die entzündliche Signalübertragung stromabwärts von Rezeptoren wie **TNFR** und **TLRs** moduliert, indem er ubiquitinabhängige Proteinkomplexe koordiniert. ABIN-1 interagiert mit der Deubiquitinase **A20/TNFAIP3**, um die Aktivierung der **NF-κB-** und **MAPK**-Signalwege zu begrenzen, und prägt dadurch die Zytokinproduktion, die Homöostase der angeborenen Immunität sowie Entscheidungen über das Zellüberleben. Eine fehlregulierte **TNIP1/ABIN-1**-Funktion wurde mit aberranter Immunaktivierung und entzündlichen Phänotypen in Verbindung gebracht, was sie zu einem nützlichen Knotenpunkt für die Untersuchung von Signalterminierung, Ubiquitinkettenerkennung und transkriptioneller Kontrolle in Immun- und Stromazellkontexten macht.

Abin-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Tnip1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Abin-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Tnip1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Abin-1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Tnip1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.