Plasmide Double Nickase (h) Abi-1: sc-417534-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Abi-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Abi-1 Double Nickase (h) et le plasmide Abi-1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ABI1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Abi-1 Antibody (C-1): sc-398554
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Abi-1 | sc-417534-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Abi-1 | sc-417534-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ABI1 code pour la protéine adaptatrice Abl interactor 1 (Abi‑1), un composant central du complexe régulateur WAVE qui relie la signalisation de Rac à la polymérisation de l’actine médiée par Arp2/3. Par ses interactions avec les kinases ABL, les signaux issus de la voie PI3K et la signalisation associée aux intégrines, Abi‑1 coordonne les ondulations membranaires, la formation de lamellipodes, l’endocytose et la dynamique de l’adhérence cellule–cellule ou cellule–matrice. Des altérations de l’expression d’ABI1 ou du câblage de son réseau ont été associées à une dérégulation du remodelage du cytosquelette et de l’équilibre des signaux dans divers contextes pathologiques, notamment des phénotypes de migration et d’invasion liés au cancer. En tant que protéine d’échafaudage, Abi‑1 constitue un nœud mécanistique pour étudier comment des voies de récepteurs et de kinases convergent vers la morphogenèse dépendante de l’actine et le trafic intracellulaire.
Abi-1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ABI1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ABI1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ABI1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ABI1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.