A20/TNFAIP3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400447-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- A20/TNFAIP3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase A20/TNFAIP3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase A20/TNFAIP3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TNFAIP3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:A20/TNFAIP3 Anticorpo (A-12): sc-166692
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
A20/TNFAIP3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400447-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
A20/TNFAIP3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400447-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O TNFAIP3 humano codifica a A20, uma enzima de edição de ubiquitina que atua como um importante regulador negativo da sinalização inflamatória. A A20 encerra a ativação das vias de NF-κB e MAPK a jusante de receptores como TNFR, IL-1R e TLRs ao modular cadeias de ubiquitina ligadas a K63 e M1 em adaptadores de sinalização, restringindo assim a produção de citocinas e prevenindo respostas excessivas de estresse celular. Por meio do controle de checkpoints de apoptose e necroptose, a A20 ajuda a manter a homeostase imunológica e a integridade dos tecidos. A desregulação ou variantes de perda de função em TNFAIP3 estão associadas a fenótipos inflamatórios exacerbados e têm sido estudadas em contextos que incluem autoimunidade, inflamação crônica e sinalização no microambiente tumoral.
A20/TNFAIP3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TNFAIP3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TNFAIP3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TNFAIP3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TNFAIP3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.